Assistant(e) Ingénieur(e) en biologie moléculaire – Clonage et librairies CRISPR

Institut Imagine; Paris; Sur place; EUR 28 000 - 38 000; Plein temps

Avantages offerts par ce poste

Prise en charge partielle des abonnés/

Transport

Résumé du poste

Institut Imagine, Paris, recrute un technicien(ne) de laboratoire en biologie moléculaire et CRISPR. Le poste est partagé à parts égales entre deux équipes Inserm U1163, et implique la conception, la production et la validation de constructions plasmidiques et librairies CRISPR, ainsi que la mise en œuvre des expériences associées.

Vous réaliserez clonage, validation, PCR/qPCR, analyses protéiques et gestion des stocks; vous documenterez rigoureusement les protocoles et contribuerez au bon

Qualifications

• Bac+2/3 en biologie moléculaire ou équivalent.
• 2 ans d'expérience en biologie moléculaire, clonage et CRISPR.
• Maîtrise des règles d'hygiène et de sécurité en laboratoire.

Responsabilités

• Concevoir et réaliser les constructions CRISPR et KO/KI; concevoir vecteurs et guides, clonages et librairies.
• Valider les constructions par digestions et séquençage.
• Réaliser PCR, qPCR, extractions et préparations plasmidiques.
• Réaliser Western blot et interpréter les résultats.
• Analyser les données, présenter les résultats en équipe.
• Développer et documenter protocoles; gérer la collection de plasmides.
• Assurer le bon fonctionnement du laboratoire et le respect des règles.

Connaissances

Biologie moléculaire

Clonage

CRISPR

Conception moléculaire

Analyse de données

Outils de design ARN guides

Hygiène et sécurité

Culture cellulaire

Formation

Bac+2/3 en biologie moléculaire

Outils

SnapGene

Benchling

Description du poste

Le contexte du poste

Le poste est partagé à parts égales (50/50) entre deux équipes de l’unité Inserm U1163 :

• L’équipe d’Inter-laboratoire Épilepsie, dirigé par le Pr Thomas Blauwblomme et le Pr Denis Jabaudon, qui étudie les épilepsies pédiatriques ;

• L’équipe du Pr Céline Greco, qui travaille sur le repositionnement thérapeutique de la douleur dans les maladies génétiques de la peau.

Les deux équipes développent des modèles cellulaires et tissulaires dans lesquels l’expression des gènes d’intérêt est modulée par édition et interférence génomiques (CRISPR/Cas, CRISPRi, CRISPRa).

Vous serez la personne de référence pour la conception, la production et la validation des constructions plasmidiques et des librairies CRISPR des deux équipes, et vous participerez à la mise en œuvre des expériences de perturbation génétique qui en découlent.

Activités principales

Clonage et librairies CRISPR :

• Concevoir et réaliser les constructions moléculairespour CRISPR et KO/KI : concevoir les vecteurs et les ARN guides, réaliser les clonages (Gibson Assembly, Golden Gate Assembly, ...), amplifier librairies de plasmides ;

• Valider les constructions et les librairies : digestions enzymatiques, séquençage Sanger et NGS.

Biologie moléculaire :

• Réaliser les techniques courantes : Extraction des acides nucléiques, PCR, qPCR, préparations plasmidiques (mini, midi, maxi) ;

• Réaliser des analyses d’expression protéique par Western blot (WB), et assurer l’interprétation et la quantification des résultats.

Données, documentation et vie du laboratoire :

• Analyser et valoriser les résultats expérimentaux: traiter et interpréter les données, et présenter les résultats en réunion d’équipe ;

• Développer, optimiser et documenter les protocoles expérimentaux: rédiger et mettre à jour les protocoles, comptes rendus d’expériences et notes techniques en fonction des besoins des projets ;

• Assurer la gestion et la traçabilité de la collection de plasmides des deux équipes: base de données, cartes de vecteurs et stocks bactériens ;

• Contribuer au bon fonctionnement du laboratoire: appliquer les règles d’hygiène et de sécurité (OGM, produits chimiques) et participer aux tâches communes.

Compétences recherchées et qualités requisesFaire preuve de rigueur, d’organisation et d’esprit critique, avec une capacité à travailler en équipe sur des projets pluridisciplinaires ;Maîtriser les approches de biologie moléculaire et de clonage, ainsi que les techniques courantes d’analyse et de validation ;Disposer d’une expérience des approches CRISPR (CRISPRi, CRISPRa, édition du génome) et de la construction de librairies de plasmides, constituant un atout majeur pour le poste ;Maitriser les logiciels de conception moléculaire (SnapGene, Benchling ou équivalent) et d’outils de design d’ARN guides ;Connaître et respecter les règles d’hygiène et de sécurité en laboratoire, notamment celles relatives à la manipulation des OGM ;Une expérience en culture cellulaire serait appréciée, mais n’est pas indispensable.Exposition aux risques professionnelsLe poste implique la manipulation d’échantillons biologiques humains, d’organismes génétiquement modifiés (OGM), de solvants et de produits CMR (cancérogènes, mutagènes, reprotoxiques). Il nécessite le respect strict des règles d’hygiène et de sécurité en vigueur. Une formation aux risques est assurée à l’arrivée.Profil recherchéNiveau dediplôme etformation(s) : Bac+2 / +3 ;Expérience(s)souhaité(s) : 2 ans d’expérience professionnelle en biologie moléculaire, clonage et approches CRISPR.ConditionsContrat : CDD de 6 mois, renouvelable deux fois ;Prise de poste : dès que possible ;Rémunération : selon la grille des contractuels Inserm, en fonction du niveau (AI ou IE) et de l’expérience ;Avantages : prise en charge partielle de l’abonnement de transport ;Lieu : Institut Imagine, Paris 15e.