Affaires Reglementaires à Grande-Bretagne

Mots-clés : Ischémie-reperfusion d’organe, immuno-régulation, lymphocytes T, alarmines, amphiréguline, cytokines, navette lactate, réparation tissulaire

Directeurs de thèse: André Herbelin et Alice Barbarin

Date clôture soumission candidature: 16/05/2025

Date début de contrat: à partir du 01/10/2025

Description du sujet:

Le syndrome d’Ischémie-reperfusion (IR) d’organe est étudié dans notre laboratoire en tant que modèle d’inflammation stérile aigue, dans le cadre d’une recherche à la fois fondamentale et à visée médicale en transplantation d’organe.

L’IR d’organe se caractérise par un important infiltrat de leucocytes et de graves lésions tissulaires dont les signaux initiateurs et de résolution restent mal décrits à ce jour.

Postulant que la libération précoce d’alarmines par les cellules en souffrance est déterminante dans ce processus, nous avons démontré dans des modèles murins qu’un mécanisme clé responsable des dommages tissulaires associés à une séquence d’IR dans le rein (Ferhrat et al, 2018) et le foie (Barbier et al, 2021) est l’axe biologique constitué de l’alarmine IL-33 et de lymphocytes T (LT) innés (LTI) dénommés iNKT (pour « invariant killer T cells »).

Prenant appui sur la littérature, on sait que l’IL-33 possède des propriétés modulatrices orientant les réponses immunitaires vers leur versant réparateur. Nous rechercherons si l’IL-33 dans notre modèle murin d’IR hépatique met en jeu d’un axe réparateur impliquant les Treg, les LTI (iNKT, MAIT et LT-γδ), les ILC (pour « innate lymphoid cells ») ainsi que les macrophages de type M2.

Comme mécanismes sous-jacents mis en jeu, nous attacherons une attention particulière à la place de : 1) l’AREG, comme facteur de croissance décrit comme médiateur direct de réparation tissulaire et comme régulateur positif de l’activité réparatrice portée par le système immunitaire (en particulier les Treg et les LTI) en réponse à l’IL-33 ; 2) du lactate et de son transporteur MCT1, dont l’interaction contrôlerait la réponse inflammatoire et sa résolution, en favorisant le versant réparateur des LTI et des Treg ou protecteur des ILC2 et des M2.

Méthodes:

Pour analyser les conséquences de la délétion d’IL-33, d’AREG et de MCT1 dans notre modèle murin, pendant les phases successives d’inflammation et de réparation, nous utiliserons des souris transgéniques issues du croisement entre des souris Cre-ert 2 tamoxifen (Cre recombinase conditionnelle dépendante du tamoxifène) et des souris avec des sites loxP flanquant un ou plusieurs exons des gènes codant l’IL-33, AREG et MCT1 (IL-33fl/fl, AREGfl/fl et MCT1fl/fl).

Dans ces différentes situations, nous réaliserons des analyses clinico-biologiques (mesure de souffrance hépatique : dosage ALAT/ASAT ; mesure des lésions et de la fibrose tissulaire ainsi que du statut de regénération/prolifération des hépatocytes par immuno-histochimie).

Parallèlement, nous évaluerons par cytométrie en flux spectrale le nombre, le phénotype (expression membranaire/intracytoplasmique de MCT1 et du récepteur ST2 de l’IL-33), le statut d’activation (expression membranaire du marqueur CD69) et les fonctions régulatrices/de réparation associées (expression membranaire/intracytoplasmique d’AREG, d’IL-10, de TGF-β et d’IL-4) des cellules immunitaires (monocytes/polynucléaires neutrophiles, Treg, ILC, iNKT, MAIT) tant localement (foie) qu’en périphérie (rate).

Comme approche complémentaire, les effets seuls ou combinés de l’IL-33 et du lactate sur les Treg et les LTI (iNKT, MAIT) en termes de prolifération, de production d’IFN-γ/TNF-α, de modulation d’expression d’AREG, de ST2 et de MCT1 ainsi que sur la différenciation M1/M2 seront modélisés in vitro à partir de sources de cellules mononucléées isolées de la rate et du foie chez la souris ainsi que de sang périphérique humain.

Présentation établissement et laboratoire d’accueil

Le laboratoire Ischémie Reperfusion, Métabolisme et Inflammation Stérile en Transplantation (IRMETIST) est une unité mixte de recherche INSERM/Université dePoitiers (U1313). L’unité fait partie intégrante de l’institut fédératif de recherche en BioSanté. Elle est située à Poitiers (entre Paris et Bordeaux, 1h30 en train), pour l’instant répartie entre le site du CHU de Poitiersà proximité de lafaculté de Médecine et de Pharmacie et le pôle de biologie santé (PBS) sur le campus de l’université de Poitiers. Le(la) doctorant(e) exercera sur le site du PBS et bénéficiera d’un environnement stimulant à proximité des autres laboratoires de l’IFR BioSanté et avec un accès privilégié aux plateformes du campus.

Les thématiques de recherche de l’unité s’articulent autour de l’amélioration des conditions de la transplantation d’organes et de l’étude des phénomènes lésionnels liées à l’ischémie-reperfusion. Dans ce contexte, notre groupe IRATI met à disposition ses compétences en immunologie fondamentale et clinique au profit des projets de l’unité.Son principal domaine d’activité est l’étude des cellules T innées en lien avec la cytokine de type alarmine IL-33, dans des situations normales et pathologiques.

Profil du candidat

Le/la candidat(e) devra être titulaire d’un Master en biologie cellulaire et/ou immunologie. Il/elle devra avoir de bonnes connaissances en immunologie cellulaire et si possible en cytométrie en flux.

Le/la candidat(e) est de nature motivée, proactive, autonome, rigoureuse, curieuse et aime prendre des initiatives.

Une formation en expérimentation animale serait appréciée. Une maîtrise de l’anglais (lu, écrit, parlé) ainsi que des qualités rédactionnelles sont demandées.

Documents à fournir

Le dossier de candidature doit comporter obligatoirement les éléments suivants :

• un CV détaillant le parcours universitaire et l’expérience professionnelle (en particulier les stages pratiques réalisés dans le cadre des études).
• une lettre de motivation
• les coordonnées d’au moins deux référents (tuteurs des stages).